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如何区别激发光光谱仪和荧光光谱仪?

点击次数:2910 更新时间:2019-03-26

   荧光光谱仪是一种定性、定量分析的仪器。通过荧光光谱仪的检测,可以获得物质的激发光谱、发射光谱、量子产率、荧光强度、荧光寿命、斯托克斯位移、荧光偏振与去偏振特性,以及荧光的淬灭方面的信息。是研究药物与蛋白质相互作用的常用仪器。药物与蛋白质相互作用后可能引起药物自身荧光光谱和蛋白质自身荧光(内源荧光)光谱以及同步荧光光谱的变化,如荧光强度和偏振度的改变、新荧光峰的出现等,这些均可以提供药物与蛋白质结合的信息。

 
  如何区别激发光光谱仪和荧光光谱仪?荧光往往很弱,如果不把它从激发光里分离出来,它会被激发光淹没。荧光测量系统,通常用以下一种或几种方法来分离荧光:
 
  1、90°布置法:激发光和探测器90°方向布置。由于荧光没有方向性,它向四周发射,因此可以把探测器放在与激发光成90°的位置来接收荧光。大部分的荧光测量装置都采用此方法(同时常常配上其它方法)。
 
  2、时间延迟法:由产生荧光的原理可知,荧光从产生到消失,它有一个时间过程(即从高能级的非稳态跃迁到低能级的亚稳态或稳态的时间)。不同的物质,这个时间的长短是不一样的,它们从几微秒到几分钟不等。我们可以给探测器的快门一个延迟时间,让激发光消失后开始对荧光采样。在一些特殊条件,如用反射探针测固体、液体的荧光时,光路无法90°布置,这时需要通过延迟采样时间来分离出荧光。
 
  3、滤波法:从荧光光谱仪产生原理可知,荧光的波长大于激发光的波长。我们在探测器前面放一个长通滤波片,它的截至波长稍大于激发光波长。这样,只有荧光才能被探测器采集。该法的另一个好处是可以虑掉一部分杂散光,但是它也可能虑掉一部分荧光。

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